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人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒操作步驟說明

2014年09月11日 11:35:16人氣:1066來源:上海研生生化試劑有限公司

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒操作步驟說明

ELISA試劑盒操作步驟:

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;

4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

ELISA試劑盒注意事項:

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

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